western blot

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  • 跑胶出现孔里残留的问题

    慌慌 发布于:2016.08.30

    宁:请问我的胶为什么会跑成这个鬼样,孔里有残留,会不会拖尾?


    LM(李大蒙):电压 时间多少


    宁:110,几分钟。还有救吗?刚调回80


    宁:有残留的孔都是我前天煮了一半才加sds继续煮的,用的新配的sds,我不知道有没有影响


    金成一:煮完冷却后 你有离心五分钟么。我们煮完离心,把那些团聚的进不了gel的蛋白质等杂志沉淀之后,用上清液load!不过一般几乎不会有什么团聚,只是为了防止才去离心的。


    宁:我们没有这个说法,反正用之前还要混匀一下。


    金成一:以我自己的经验,不离心的样品,的确有时候在孔里有残留,不过这情况极少,而且之前这样有残留的孔做出来的结果也挺干净的,没有非特异条带出来。不过,个人觉得还是得看蛋白自身和你用的抗体。




     
    1条评论 251浏览 邀请回答

    真·科研狗 回答于:2016年08月31日 00:10:031楼

     北京大学 医学部基础医学院 细胞生物学 博士 

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