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  • 提取细胞蛋白,出现透明粘稠物的问题

    慌慌 发布于:2016.08.30

    问题:提取细胞蛋白时,出现鼻涕似的透明粘稠物是什么情况?


    小杨:据说,是裂解出来的核酸,加上裂解液就超声(超声探头:超声3次,每次3秒),然后再放冰上静置就好了。


    wb-慌慌:蛋白有透明粘稠物是因为没有裂解充分,或者加的裂解液少。如果是贴壁细胞,加裂解液后,可以用刮刀反复,利用机械力使细胞破碎,直到细胞液不粘稠。


    蜗小懒:大家提组织蛋白研磨好之后,怎么离心?转速?时间?


    wb-慌慌:刮好的细胞液转移到EP管中,可在冰上静置20-30min,然后12000rpm,4℃,20min或者15000rpm,4℃,10min。组织蛋白也可以采用这个离心条件。


     
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