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  • GAPDH内参变为3个条带

    匿名 发布于:2016.08.30

    扎西格桑:请问一下大师们这种情况有没有见过,这是两个泳道的内参,gapdh,上样量是一样的,而跑出来有一个有三个条带。用imageJ分析后发现左侧三个条带一起的灰度值和右侧条带灰度值基本一致。而如果只分析最上面条带,很明显差异很大。请问这是什么情况,重复了几次都是这样。


    王娜:只用过ACTIN


    扎西格桑:理论上内参蛋白很稳定不会有亚基或者裂解吧?


    科研狗:理论上是的。但是你重复了几次都是这样就奇怪了。你这两个样品分别是怎么处理的?


    wb-慌慌:这两个样品是不是不同的组织或细胞,还有取材时间一样吗?


    扎西格桑:是同一种细胞 ,处理也是相同的@刘惠蛟 这是啥情况…从来没遇到过…重复好几次都是这样


    金成一:莫非是抗体问题?一般遇到这种重复多次还是同一结果的情况下,就会问前辈或者老师借些肯定可以出正确结果的sample来做,也就是他们之前存留的sample,如果还是你这问题,那就真的可能得各个步骤都得跟你前辈检查探讨了。

    科研狗:你的marker呢? 


    扎西格桑:marker是用的那种暴不出来的那种


    科研狗:你在同一块胶上面多重复跑几个孔看看


    扎西格桑:对啊…特别困惑…而且左边那三个如果一起分析是和右边内参条带灰度值基本一致的,莫非裂解勒?好的,下回重复一下多跑几个孔试试,多谢大神

     
    2条评论 273浏览 邀请回答

    慌慌 回答于:2016年08月30日 20:42:231楼

     中国药科大 药学院 药学 硕士 

    金成一:建议顺便把之前其他肯定成功的一个或几个细胞株的sample都放在用一个膜上上样,做阳性对照,看条带和之前是否一样,否则没对比也看不出来什么

    文风 回答于:2016年08月31日 16:09:312楼

     湖南师大 生命科学学院 生物化学 本科 

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