质粒克隆

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    L.D.M 发布于:2017.04.19

    我的目的片段5000bp ,然后连接到pgl3质粒载体上,转DH5a感受态,但涂板子什么都长不出来,求助,有木有人知道怎么办

     
    2条评论 207浏览 邀请回答

    真·科研狗 回答于:2017年04月19日 20:33:121楼

     北京大学 医学部基础医学院 细胞生物学 博士 

    5000BP略长,你连接的比例和总质量多少,我做过4000长度目的片段连入PGL3,第一次也没涨,第二次100ng目的片段,100ng载体,连过夜。长了几个,送三个测序有两个是正确的。这个很大程度上看运气了,先确定体系没问题,祝你好运

    L.D.M 回答于:2017年04月20日 17:52:172楼

    西安 西北农林科技大学 动物学 

    我用的是100ng的载体和200ng的片段,后来换了100ng的载体和500的片段都没有长出来


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