质粒克隆

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  • 质粒测序少了100多bp

    智能科研狗 发布于:2016.09.01

    可乐:大家好,我想咨询一个关于测序方面的问题。我的片段1500左右,测序时正向测序信号中断,反向测序成功~我比对了一下反向成功的序列,基本都正确。但正向少了100多bp。那么我还能用这个保种的继续下一步么?


    金成一:担心的话最好在正向设计多一个primer测序,靠中间些,但是离你那没测出的一百多bp最好远一点,或者你用这个基因的qRT-PCR的primer来用于测序也可以成功的,那就不需要再麻烦设计多一个了(只要这个qPCR的primer不是在那没测出的100多bp里就好),纯粹个人意见,我比较纠结于能否把完整序列读出来


    可乐:哦哦,刚进实验室,遇到了太多问题。嗯嗯,我用您的方法先试一下


    金成一:你刚进研究室就能懂那么多,一说就明白已经很好了,我刚到的时候,序列是咋测的,载体是什么鬼,怎么用的,完全不知道


    可乐:还得感谢像你们一样帮助我的人,感谢科研狗,感谢小木虫,感谢生物秀,感谢百度……

     

     
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