质粒克隆

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  • 请问一下预测了已知基因和抑制转录因子之间的结合位点后怎么设计荧光素酶报告系统进行验证

    harden9159 发布于:2018.11.29

    请问一下预测了已知基因和抑制转录因子之间的结合位点后怎么设计荧光素酶报告系统进行验证,需要用到的有预测位点序列,以及转录因子序列,请问转录因子序列是用哪一段,还是直接用引物进行扩增,就是如何构建表达转录因子的蛋白质粒,从来没有做过相关的实验,请各位帮忙解答一下,谢谢

     
    1条评论 41浏览 邀请回答

    真·科研狗 回答于:2018年12月01日 10:32:321楼

     北京大学 医学部基础医学院 细胞生物学 博士 

    把该段启动子区域克隆到pGL3里面,首先验证该启动子是具有启动活性的;接下来共转启动子和你的转录因子质粒,看启动子活性是否剂量递增;然后把启动子区域的某一段序列去掉,看是否还有启动子活性


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